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固相萃取原理及操作步驟

更新日期: 2016-05-26
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固相萃取原理及操作步驟

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  固相萃取主要通過(guò)目標(biāo)物與吸附劑之間的以下作用力來(lái)保留/吸附的1)疏水作用力:如C18、C8、Silica、苯基柱等2)離子交換作用:SAX,SCX,COOH、NH2等3)物理吸附:Florsil、Alumina等

  pH值對(duì)固相萃取的影響

  pH值可以改變目標(biāo)物/吸附劑的離子化或質(zhì)子化程度。對(duì)于強(qiáng)陽(yáng)/陰離子交換柱來(lái)講,因?yàn)槲絼┍旧硎?離子化的狀態(tài),目標(biāo)物必須*離子化才可以保證其被吸附劑*吸附保留。而目標(biāo)物的離子化程度則與pH值有關(guān)。如對(duì)于弱堿性化合物來(lái)講,其pH值必須小于其pKa值兩個(gè)單位才可以保證目標(biāo)物*離子化,而對(duì)于弱酸性化合物,其pH值必須大于其pKa值兩個(gè)單位才能保證其*離子化。對(duì)于弱陰/陽(yáng)離子交換柱來(lái)講,必須要保證吸附劑*離子化才保證目標(biāo)物的*吸附,而溶液的pH值必須滿足一定的條件才能保證其*離子化。

  固相萃取操作步驟及注意事項(xiàng)

  針對(duì)填料保留機(jī)理的不同(填料保留目標(biāo)化合物或保留雜質(zhì)),操作稍有不同。

  1)填料保留目標(biāo)化合物

  固相萃取操作一般有四步:

  活化----除去小柱內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。(注意整個(gè)過(guò)程不要使小柱干涸)

  上樣----將樣品用一定的溶劑溶解,轉(zhuǎn)移入柱并使組分保留在柱上。(注意流速不要過(guò)快,以1ml/min為宜,大不超過(guò)5ml/min)

  淋洗----大程度除去干擾物。(建議此過(guò)程結(jié)束后把小柱*抽干)

  洗脫----用小體積的溶劑將被測(cè)物質(zhì)洗脫下來(lái)并收集。(注意流速不要過(guò)快,以1ml/min為宜)

  2)填料保留雜質(zhì)

  固相萃取操作一般有三步:

  活化--除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。(注意整個(gè)過(guò)程不要使小柱干涸)

  上樣--將樣品轉(zhuǎn)移入柱,此時(shí)大部分目標(biāo)化合物會(huì)隨樣品基液流出,雜質(zhì)被保留在柱上,故此步驟要開(kāi)始收集(注意流速不要過(guò)快)

  洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來(lái)并收集,合并收集液。(注意流速不要過(guò)快)

  此種情況多用于食品或農(nóng)殘分析中去除色素。

 

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